质量保证:确保制备的病毒颗粒携带片段的正确性,病毒颗粒的总数和病毒颗粒的滴度达到要求
去除了病毒的关键蛋白,对人体安全;属于复制缺陷型病毒,不会产生下一代病毒颗粒;已被改造为自身失活性,病毒转导并整合到细胞后不再具有产生具有包装能力的病毒基因组。
稳定整合到细胞基因组,可用于制备多种稳定沉默特定基因的细胞株
1.客户提供:表达miRNA/shRNA的质粒(提供测序图谱)或所要Knockdown的靶基因的名称、序列;所需要的病毒滴度及总量,病毒是否需要纯化;若需要检测靶基因的表达变化,如需要请提供相应的抗体
2.含目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和纯化提取;
3.慢病毒干扰载体、pGag/Pol、pRev、pVSV-G四质粒共转染293T细胞;
4.培养48~72h,收集培养上清;
5.病毒的纯化和浓缩;
6.滴度测定、目的基因检定
7.将制得的慢病毒液转导客户的靶细胞,筛选混合稳定细胞株,并检测靶基因的表达。
8.j6国际提供:提供重组后的慢病毒载体质粒,并附上PCR鉴定结果;提供已测定好滴度、可以直接进行后续分析的慢病毒储存液
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