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siRNA/miRNA合成

j6国际优势

1.质量保证：可进行科学的序列设计，针对某靶基因设计的3条siRNA可保证其中两条的Knockdown效率达到70%（在转染效率大于80%的情况下）

2.siRNA oligo均由HPLC纯化，100％除去尚未配对的单链，多种修饰选择：末端修饰（FAM，Biotin等），碱基修饰（2’-OMe）

原理

在RNAi效应阶段，siRNA双链结合一个核酶复合物从而形成所谓RNA诱导沉默复合物（RNA-induced silencing complex, RISC）。激活的RISC通过碱基配对定位到同源mRNA转录本上，并在距离siRNA3’端12个碱基的位置切割mRNA。

化学合成的siRNA具有操作简便、转染效率高、对细胞的或者组织的毒副作用小、可大规模制备等优点，特别适用于基因靶位点不确定情况下，进行siRNA有效片段的筛选。

服务流程

1.客户提供：siRNA oligo的序列信息或相应的靶基因信息（便于设计），以及技术要求（包括OD和nmols的精确数量、纯化类型、修饰要求等）

2.根据序列信息，进行化学合成；

3.HPLC纯化；经过分光光度计精确定量

4.冻干处理

5.j6国际提供：长度19-23碱基/链的siRNA，产品形式为退火的双链RNA的冻干粉，有以下选择

6.普通siRNA

7.化学修饰siRNA－利用2’-Fluoro或2’－OMe修饰以提高siRNA在血清和培养基中的稳定性；作用时间长于普通siRNA；荧光标记siRNA

8.siRNA对照，包括普通阴性对照（与目的靶细胞中所有基因无同源性的阴性对照）、荧光标记的阴性对照（方便在荧光显微镜下观察转染的效率，有利于优化转染条件）和siRNA阳性对照（作为一个实验系统检查，确保在实验方法中您的转染、RNA提取物和检测方法是可靠的；常用的siRNA阳性对照有LaminA/C，Beta-Actin，P53，GAPDH等）